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2021-07-27

Westernblot实验过程中常见问题汇总及处理方案。21、想分离的蛋白是分子量200kd的,SDS-PAGE电泳的分离胶浓度多大合适?浓缩胶的浓度又该用多少?这么大分子量的蛋白容易作WesternBlot吗?答:分离胶用7%,浓缩胶3.5%,200kd的蛋白不好做。22、如果上样量超载,要用什么方法来增加上样量?答:可以浓缩样品,也可以根据你的目标分子量透析掉一部分小分子蛋白。一般地,超载30%是不会有问题的。如果已经超了不少了,而且小分子量的也要,可以考虑加大胶的厚度,...

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2021-07-27

Westernblot实验过程中常见问题汇总及处理方案。1、westernblot的优点及缺点答:优点:灵敏,特异性高,常规可达ng级,Ecl显色法理论上可达pg级。缺点:通量有限。2、为什么我的细胞提取液中没有目标蛋白?答:原因有很多:首先排除WB过程是不是抗体的问题,重新实验、更换抗体;其次排除蛋白是否降解,提取的时候需要加入蛋白酶抑制剂,a)你的细胞中不表达这种蛋白质,换一种细胞;最后考虑此种细胞是否表达该蛋白,表达量高低。3、提取液有的有沉淀,有的很清亮,为什么呢?答...

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2021-07-27

染色质免疫沉淀(chromatinimmunoprecipitationassay,ChIP)是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。ChIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。而...

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2021-07-27

分子生物学主要研究具体生物大分子在某一生物学行为过程中的表达变化、功能和作用方式;主要涉及基因的表达调控、蛋白相互作用、信号分子间的交互对话等。分子生物学实验常需要我们在具体实验前对所关注的基因的一些基本信息、可能受哪些因素调控、与哪些分子可能存在潜在的相互作用,可能参与哪些生物学行为等进行一些初步的判断,然后根据这些信息,提出合理的实验设计,并通过生物学实验加以验证。那么,如何获得上面的这些信息,除了根据实验结果提供的线索和深入研究相关文献以外,还会用到一些分子生物学数据库...

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2021-07-26

RT-PCR,逆转录PCR或称反转录PCR(ReverseTranscriptionPCR),是聚合酶链式反应的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,RNA在逆转录酶的作用下被逆转录成为互补DNA(complementaryDNA,cDNA),再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。基本原理:用逆转录酶以RNA为模板合成与其互补的DNA(cDNA)的过程。因为mRNA末端存在PolyA,所以用OligodT作为通用引物与其互补。商品化的反转录试剂盒里通常除了OligodT之外,...

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2021-07-23

对于手机上买球软件有哪些 ,我们并不陌生,现在几乎家家户户都有手机上买球软件有哪些 ,这是一种常用家电,而防爆手机上买球软件有哪些 主要应用在石油、化工、军事、医药、科研、实验室等领域,属于特种手机上买球软件有哪些 。实验室防爆手机上买球软件有哪些 用于储存易燃、易爆、易蒸发、易腐蚀等化学试剂、实验试剂等,适用于高校各实验室、科研单位的实验场所等,就是为了防止爆炸引起的人员或者财产上的损失。美菱生物医疗2~8℃防爆手机上买球软件有哪些 产品特点:全面防静电:箱壳与内衬、门壳及门内衬均采用铜绞线连接,存储空间内各活动部件均为金属制作。多种防爆方式:整机防爆,采用隔爆型、本质安全型及浇...

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2021-07-23

通常我们会将实验室的纯水分为四个不同的等级,按照级别分为:纯水、去离子水、实验室Ⅱ级纯水以及超纯水。这四类不同的纯水通常根据电导率来进行区分和检测。1、纯水纯水也叫纯化水,它的电导率会在1-50μs/cm之间,它可经由单一弱碱性阴离子交换树脂、反渗透或单次蒸馏制成。一般应有在玻璃器皿清洗、清洗剂用水、恒温恒湿实验室和高压灭菌器之间。2、去离子水去离子水的电导率通常都在1.0-0.1μs/cm之间,通过采用含强阴离子交换树脂的混床离子交换制成。它们能够满足各种制备试剂、稀释样品...

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